WikiDer > Antisense-Gen
EIN Antisense-Gen ist ein Gen das von genetische Manipulation in umgekehrter Reihenfolge wieder im DNA Wurde festgelegt. Dies blockiert die Funktion des natürlich vorhandenen Gens. Dieses Prinzip wird als "Gen-Knockdown" bezeichnet, da es weniger invasiv ist als "schlagen"Methoden, bei denen das Gen inaktiviert oder vollständig gelöscht wird.
Diese Technik kann verwendet werden, um Wirkmechanismen anderer Gene aufzuklären. Dabei wird der molekulare oder phänotypische Unterschied zwischen der Knock-down-Variante und der „normalen“ Variante betrachtet. Somit kann eine Antisense-Therapie eine Alternative zu Knockout-Mutationen sein.
Der Blockierungsmechanismus des "normalen" Gens beruht auf der Inaktivierung des mRNA (Messenger-RNA) durch die Antisense-RNA. Hierfür sind verschiedene Mechanismen möglich, ua: Besetzung der Ribosomen-Bindungsstelle (RBS) und Bildung von dsRNA, die zu einem verstärkten mRNA-Abbau führen kann.
Antisense-RNA kann im Genom cis- oder trans-kodiert sein. Bei der cis-Kodierung befindet sich die Antisense-RNA gegenüber dem Zielgen auf der DNA. Es besteht also eine perfekte Basenpaar-Komplementarität. Beim Transkodieren wird die Antisense-RNA nicht gegenüber dem Zielgen kodiert (sie kann selbst an einem anderen Locus kodiert sein). Häufig wird die Interaktion zwischen Target und trans-RNA durch das Chaperonprotein HfQ unterstützt.