WikiDer > DNA-Mikroarray
EIN DNA-Mikroarray ist ein Mikrofluidischer Chip mit einer großen Menge Flecken mit einem anderen an jeder Stelle Gen an der Unterseite der Platte befestigt. Heutzutage ist es auch möglich, die DNA Base-to-Base direkt auf dem Glas aufzubauen.
Der Teil, der an der Platte befestigt wird, wird als Sonde bezeichnet. Dies können Gene sein, die im Handel erhältlich sind, Gene, die selbst gereinigt und verwendet werden Polymerase-Kettenreaktionen haben zugenommen oder ausgedrückte Sequenz-Tags. Dies sind die Gene, die Menschen für die Erforschung ausgewählt haben.
Außerdem werden eine Kontrollprobe und eine Testprobe für die Analyse vorbereitet. Beispielsweise können die Testproben Gehirntumorzellen sein. In diesem Fall nehmen Sie normales Gehirnzellgewebe für die Kontrollgruppe. Die mRNA aus der Kontrollprobe wird extrahiert, mit umgekehrte Transkriptase konvertiert zu cDNA und fluoreszierend grün markiert. Aus der Testprobe ist die revers transkribierte cDNA rot fluoreszierend markiert.
Diese beiden markierten cDNA-Produkte werden gepoolt und auf die Platte gegossen. Die cDNA bindet (hybridisiert) an die Gene an den Stellen, die komplementär Reihenfolge, unabhängig von der Farbe. Nach einer Inkubationszeit alle ungebundenen cDNA-Moleküle werden weggewaschen, danach wird die Platte unter die Fluoreszenzmikroskop kann betrachtet werden.
Danach gibt es drei Möglichkeiten: Ein Fleck ist grün, rot oder gelb (eine Kombination aus Rot und Grün). Ist der Fleck gelb, ist die Expression des Gens in Tumorzellen und gesunden Zellen gleich hoch. Wenn es rot ist, ist das Expressionsniveau in den Tumorzellen höher als in den gesunden Zellen, und wenn es grün ist, ist das Expressionsniveau in den gesunden Zellen höher.
Wenn ein Gen bei dieser Krebsart häufig eine veränderte Expression aufweist, kann dies bedeuten, dass der Tumor von dieser veränderten Expression abhängig ist. Gene, die bei Krebs häufig verändert werden, sind Onkogene und Tumorsuppressorgene.