WikiDer > Генная терапия сетчатки глаза человека

Gene therapy of the human retina

Сетчатка генная терапия обещает лечить различные формы ненаследственных и наследуемых слепота.

В 2008 году три независимые исследовательские группы сообщили, что пациенты с редким генетическим заболеванием сетчатки Врожденный амавроз Лебера успешно лечился с помощью генной терапии с аденоассоциированный вирус (AAV).[1][2][3] Во всех трех исследованиях вектор AAV использовался для доставки функциональной копии гена RPE65, который восстанавливает зрение у детей, страдающих LCA. Эти результаты были широко расценены как успех в области генной терапии и вызвали волнение и импульс для применения AAV при заболеваниях сетчатки.

В генной терапии сетчатки наиболее широко используемые векторы для доставки глазных генов основаны на аденоассоциированный вирус. Большим преимуществом использования аденоассоциированного вируса для генной терапии является то, что он представляет минимальную иммунные ответы и долгосрочное посредничество трансген экспрессия в различных типах клеток сетчатки. Например, плотные соединения, образующие барьер между кровью и сетчаткой, отделяют субретинальное пространство от кровоснабжение, обеспечивая защиту от микробы и уменьшение большинства иммунно-опосредованных повреждений.[4]

Клинические испытания

Врожденный амавроз Лебера

Доклинические исследования на мышиных моделях Врожденный амавроз Лебера (LCA) были опубликованы в 1996 году, а исследование на собаках - в 2001 году. В 2008 году три группы сообщили о результатах клинических испытаний с использованием аденоассоциированный вирус для LCA. В этих исследованиях вектор AAV, кодирующий RPE65 Ген был доставлен с помощью «субретинальной инъекции», когда небольшое количество жидкости вводится под сетчатку в ходе короткой хирургической процедуры.[5] Разработка продолжалась, и в декабре 2017 года FDA одобрило Воретиген непарвовец (Luxturna), аденоассоциированный вирус векторная генная терапия для детей и взрослых с двуаллельными мутациями гена RPE65, ответственными за дистрофию сетчатки, включая врожденный амавроз Лебера. У людей должны быть жизнеспособные клетки сетчатки в качестве предварительного условия для внутриглазного введения препарата.[6]

Возрастная дегенерация желтого пятна

После успешных клинических испытаний в LCA, исследователи разработали аналогичные методы лечения с использованием аденоассоциированного вируса для возрастная дегенерация желтого пятна (AMD). На сегодняшний день усилия сосредоточены на долгосрочной доставке VEGF ингибиторы для лечения влажной формы дегенерации желтого пятна. В то время как влажная AMD в настоящее время лечится с помощью частых инъекций рекомбинантного белка в глазное яблоко, целью этих методов лечения является долгосрочное лечение заболевания после однократного введения. Одно такое исследование проводится в Институт Lions Eye в Австралии[7] в сотрудничестве с Avalanche Biotechnologies, американским биотехнологическим стартапом. Еще одно раннее исследование спонсируется Genzyme Corporation.[8]

Хориидеремия

В октябре 2011 г. было объявлено о первом клиническом исследовании лечения хориидеремия.[9] Доктор Роберт Макларен из Оксфордского университета, который руководил исследованием, разработал лечение совместно с доктором Мигелем Сибра из Имперского колледжа в Лондоне. В этом испытании фазы 1/2 для восстановления гена REP у пораженных пациентов использовался субретинальный AAV.[10]Первоначальные результаты исследования были опубликованы в январе 2014 года как многообещающие, поскольку у всех шести пациентов было лучшее зрение.[11][12]

Дальтонизм

Основная статья: Генная терапия дальтонизма

Недавние исследования показали, что AAV может успешно восстанавливать цветовое зрение для лечения дальтонизм у взрослых обезьян.[13] Хотя это лечение еще не вошло в клинические испытания на людях, эта работа считалась прорывом в способности воздействовать на фоторецепторы колбочек.[14]

Механизм

Физиологические компоненты генной терапии сетчатки

Нервная сетчатка позвоночных состоит из нескольких слоев и различных типов клеток (см. анатомия сетчатки глаза человека). Некоторые из этих типов клеток вовлечены в заболевания сетчатки, в том числе ганглиозные клетки сетчатки, которые перерождаются в глаукому, стержень и конус фоторецепторы, которые чувствительны к свету и вырождаются в пигментный ретинит, дегенерация желтого пятна, и другие заболевания сетчатки, и пигментный эпителий сетчатки (RPE), который поддерживает фоторецепторы, а также участвует в пигментный ретинит и дегенерация желтого пятна.

В сетчатке генная терапия, AAV способен «трансдуктировать» эти различные типы клеток, проникая в клетки и экспрессируя терапевтическую последовательность ДНК. Поскольку клетки сетчатки не делятся, AAV продолжает сохраняться и обеспечивать экспрессию терапевтической последовательности ДНК в течение длительного периода времени, который может длиться несколько лет.[15]

Тропизм AAV и пути введения

AAV способен трансдуктировать несколько типов клеток сетчатки. AAV серотипа 2, наиболее хорошо изученный тип AAV, обычно вводится одним из двух путей: интравитреальным или субретинальным. Используя интравитреальный путь, AAV вводится в стекловидное тело глаза. Используя субретинальный путь, AAV вводится под сетчатку, используя потенциальное пространство между фоторецепторами и слоем RPE, в ходе короткой хирургической процедуры. Хотя этот способ более инвазивен, чем интравитреальный путь, жидкость абсорбируется RPE, и сетчатка выравнивается менее чем за 14 часов без осложнений.[1] Интравитреальный AAV нацелен на ганглиозные клетки сетчатки и несколько глиальных клеток Мюллера. Субретинальный AAV эффективно воздействует на фоторецепторы и клетки RPE.[16][17]

Причина, по которой разные пути введения приводят к трансфекции разных типов клеток (например, разных тропизм) заключается в том, что внутренняя ограничивающая мембрана (ILM) и различные слои сетчатки действуют как физические барьеры для доставки лекарств и переносчиков в более глубокие слои сетчатки.[18] Таким образом, в целом субретинальный AAV в 5-10 раз более эффективен, чем доставка с использованием интравитреального пути.

Модификация тропизма и новые векторы AAV

Один важный фактор в доставка генов развивается изменено клеточные тропизмы для сужения или расширения доставки rAAV-опосредованного гена и для повышения его эффективности в тканях. Специфические свойства, такие как конформация капсида, стратегии нацеливания на клетки, могут определять, какие типы клеток затронуты, а также эффективность передача гена процесс. Могут быть предприняты различные виды модификации. Например, модификация путем химических, иммунологических или генетических изменений, которая позволяет капсиду AAV2 взаимодействовать со специфическими молекулы клеточной поверхности.[19]

Первоначальные исследования AAV в сетчатке использовали серотип AAV 2. В настоящее время исследователи начинают разрабатывать новые варианты AAV, основанные на естественных серотипах AAV и сконструированных вариантах AAV.[20]

Было выделено несколько встречающихся в природе серотипов AAV, которые могут трансдуктировать клетки сетчатки. После интравитреальной инъекции только серотипы 2 и 8 AAV были способны трансдуктировать ганглиозные клетки сетчатки. Случайные клетки Мюллера трансдуцировались серотипами 2, 8 и 9 AAV. После субретинальной инъекции серотипы 2, 5, 7 и 8 эффективно трансдуцировали фоторецепторы, а серотипы 1, 2, 5, 7, 8 и 9 эффективно трансдуцируют клетки RPE. .[17]

Недавно был описан один пример сконструированного варианта, который эффективно трансдуцирует глии Мюллера после интравитреальной инъекции, и был использован для спасения модели агрессивного аутосомно-доминантного пигментный ретинит.[21][22]

AAV и иммунная привилегия сетчатки

Важно отметить, что сетчатка является иммунной и поэтому не испытывает значительного воспаления или иммунного ответа при инъекции AAV.[23] Иммунный ответ на векторы для генной терапии - это то, что приводило к неудачам предыдущих попыток генной терапии, и считается ключевым преимуществом генной терапии для глаз. Повторное введение было успешным у крупных животных, что указывает на отсутствие длительного иммунного ответа.[24]

Последние данные показывают, что субретинальный путь может иметь большую иммунную привилегию по сравнению с интравитреальным путем.[25]

Последовательность промотора

Экспрессию в различных типах клеток сетчатки можно определить по промоторной последовательности. Чтобы ограничить экспрессию конкретным типом клеток, можно использовать тканеспецифический или специфичный для клеточного типа промотор.

Например, в крысы ген родопсина мыши управляет экспрессией в AAV2, репортерный продукт GFP был обнаружен только в фоторецепторах крыс, но не в клетках любого другого типа сетчатки или в соседнем RPE после субретинальной инъекции. С другой стороны, при повсеместном выражении немедленное - раннее цитомегаловирус (CMV) энхансер-промотор экспрессируется в широком спектре трансфицированных типов клеток. Другие распространенные промоторы, такие как промотор CBA, слияние промотора куриного актина и энхансера немедленного раннего CMV, обеспечивают стабильную экспрессию репортера GFP как в клетках RPE, так и в фоторецепторных клетках после субретинальных инъекций.[26]

Модуляция выражения

Иногда может потребоваться модуляция экспрессии трансгена, поскольку сильная конститутивная экспрессия терапевтического гена в тканях сетчатки может быть вредной для долгосрочной функции сетчатки. Для модуляции экспрессии использовались разные методы. Один из способов - использовать экзогенно регулируемую промоторную систему в векторах AAV. Например, тетрациклин-индуцируемая система экспрессии использует вектор глушителя / трансактиватора AAV2 и отдельную индуцибельную совместную инъекцию, отвечающую за доксициклин.[26][27] Когда индукция происходит перорально доксициклинэта система демонстрирует жесткую регуляцию экспрессии генов как в фоторецепторных клетках, так и в клетках RPE.

Примеры и модели на животных

Ориентация на RPE

Одно исследование, проведенное Королевский колледж хирургов (RCS) на модели крыс показывает, что рецессивная мутация в гене рецепторной тирпозинкиназы, mertk, приводит к преждевременной остановке кодон и нарушение функции фагоцитоза клетками RPE. Эта мутация вызывает накопление обломков внешнего сегмента в субретинальном пространстве, что приводит к тому, что фоторецепторы смерть клетки. Модельный организм с этим заболеванием получил субретинальную инъекцию AAV серотипа 2, несущего кДНК мыши Mertk под контролем промоторов CMV или RPE65. Было обнаружено, что это лечение продлевает выживаемость фоторецепторных клеток на несколько месяцев. [28] а также количество фоторецепторов было в 2,5 раза выше в глазах, обработанных AAV-Mertk, по сравнению с контрольной группой через 9 недель после инъекции, также они обнаружили снижение количества мусора в субретинальном пространстве.

Белок RPE65 используется в ретиноидном цикле, где полностью транс-ретинол в наружном сегменте стержня изомеризуется до своей 11-цис-формы и окисляется до 11-цис-ретиналя, прежде чем он вернется к фоторецептору и соединится с молекулой опсина с образованием функциональный родопсин.[29] В модели животных с нокаутом (RPE65 - / -) эксперимент по переносу генов показывает, что ранняя внутриглазная доставка вектора RPE65 человека на 14-й день эмбриона демонстрирует эффективную трансдукцию пигментного эпителия сетчатки у мышей с нокаутом RPE65 - / - и восстанавливает зрительные функции. Это показывает, что успешная генная терапия может быть связана с ранней внутриглазной доставкой больному животному.

Нацеливание на фоторецепторы

Несовершеннолетний ретиношизис болезнь, поражающая нервная ткань в глаза. Это заболевание представляет собой Х-сцепленное рецессивное дегенеративное заболевание центральной нервной системы. пятно области, и это вызвано мутацией в гене RSI, кодирующем белок ретиношизин. Ретиношизин вырабатывается фоторецепторами и биполярными клетками и имеет решающее значение для поддержания синаптической целостности сетчатки.[26]

В частности, вектор AAV 5, содержащий кДНК RSI дикого типа человека, управляемую мышь Промотор опсина показал долгосрочное функциональное и структурное восстановление сетчатки. Кроме того, структурная надежность сетчатки после лечения значительно улучшилась, что характеризовалось увеличением внешний ядерный слой толщина.[26]

Пигментный ретинит

Пигментный ретинит наследственное заболевание, которое приводит к прогрессирующему куриная слепота и потеря периферийное зрение в результате гибели фоторецепторных клеток.[26][30][31] Большинство людей, страдающих РПЖ, рождаются с стержневые клетки которые либо мертвы, либо недееспособны, поэтому они фактически слепы в ночное время, поскольку это клетки, ответственные за зрение при слабом освещении. Часто следует смерть конические клетки, отвечающий за цветовое зрение и остроту зрения при дневном освещении. Выпадение колбочек приводит к полной слепоте уже в пятилетнем возрасте, но может наступить только через много лет. Было высказано множество гипотез о том, как отсутствие стержневых клеток может привести к гибели колбочек. Точное определение механизма RP затруднено, поскольку существует более 39 генетических локусов и генов, коррелирующих с этим заболеванием. В попытке найти причину РП были применены различные методы генной терапии для решения каждой из гипотез.[32]

К этому заболеванию можно отнести различные типы наследования; аутосомно-рецессивный, аутосомно-доминантный, Х-сцепленный тип и т. д. Основная функция родопсина - инициировать фототрансдукция каскад. Белки опсина образуются во внутренних сегментах фоторецепторов, затем транспортируются во внешний сегмент и в конечном итоге фагоцитируются клетками RPE. Когда в родопсине происходят мутации, это влияет на направленное движение белка, поскольку мутации могут влиять на сворачивание белка, стабильность и внутриклеточный трафик. Один из подходов - введение рибозимов, доставляемых AAV, предназначенных для нацеливания и разрушения мутантной мРНК.[26]

Принцип действия этой системы был показан на модели животных, у которых есть мутантный ген родопсина. Введенные AAV-рибозимы были оптимизированы in vitro и используется для расщепления мутантного транскрипта мРНК P23H (где происходит большинство мутаций) in vivo.[26]

Другая мутация в структурном белке родопсина, в частности в периферине 2, который представляет собой мембранный гликопротеин, участвующий в формировании диска внешнего сегмента фоторецептора, может приводить к рецессивному RP и дегенерация желтого пятна в человеческом[30] (19). В эксперименте на мышах AAV2, несущий ген периферина 2 дикого типа, управляемый промотором родопсина, был доставлен мышам посредством субретинальной инъекции. Результат показал улучшение структуры и функции фоторецепторов, что было обнаружено с помощью ЭРГ (электроретинограммы). Результат показал улучшение структуры и функции фоторецепторов, что было обнаружено ERG. Также периферин 2 был обнаружен в слое наружного сегмента сетчатки через 2 недели после инъекции, а терапевтические эффекты были отмечены уже через 3 недели после инъекции. Четко выраженный внешний сегмент, содержащий как периферин2, так и родопсин, присутствовал через 9 месяцев после инъекции.[26]

С апоптоз может быть причиной смерти фоторецепторов при большинстве дистрофий сетчатки. Было известно, что факторы выживания и антиапоптозные реагенты могут быть альтернативным лечением, если мутация неизвестна для генной заместительной терапии. Некоторые ученые экспериментировали с лечением этой проблемы, вводя в глаз замещающие трофические факторы. Одна группа исследователей вводила белок фактора жизнеспособности колбочек, полученный из палочек (RdCVF) (кодируемый геном Nxnl1 (Txnl6)), в глаза на моделях крыс с наиболее часто встречающимися доминантными мутациями RP. Это лечение продемонстрировало успех в обеспечении выживания активности колбочек, но лечение послужило еще более важным для предотвращения прогрессирования заболевания за счет увеличения фактической функции колбочек.[33] Также были проведены эксперименты по изучению возможности снабжения векторов AAV2 кДНК для глиальная клетка линейный нейротрофический фактор (GDNF) может оказывать антиапоптозное действие на стержневые клетки.[26][34]На животной модели трансген опсина содержит усеченный белок, в котором отсутствуют последние 15 аминокислоты С-конца, что вызывает изменение транспорта родопсина к внешнему сегменту и приводит к дегенерации сетчатки.[26] Когда вектор AAV2-CBA-GDNF вводится в субретинальное пространство, фоторецепторы стабилизируются, а количество палочковых фоторецепторов увеличивается, и это проявляется в улучшении функции анализа ERG.[34] Успешные эксперименты на животных были также проведены с использованием цилиарного нейротрофического фактора (CNTF), и CNTF в настоящее время используется в качестве лечения в клинических испытаниях на людях.[35]

Лечение неоваскулярных заболеваний сетчатки на основе AAV

Глазная неоваскуляризация (NV) - это ненормальное образование новых капилляров из уже существующих кровеносных сосудов в глазу, и это характерно для глазных заболеваний, таких как диабетическая ретинопатия (DR), ретинопатия недоношенных (ROP) и (влажная форма) возраст- связанная дегенерация желтого пятна (AMD). Одним из основных игроков в этих заболеваниях является VEGF (фактор роста эндотелия сосудов), который, как известно, вызывает утечку сосудов и который также известен как ангиогенный.[26] В нормальных тканях VEGF стимулирует пролиферацию эндотелиальных клеток дозозависимым образом, но такая активность теряется с другими ангиогенными факторами.[36]

Было показано, что многие ангиостатические факторы противодействуют эффекту увеличения местного VEGF. Было показано, что встречающаяся в природе форма растворимого Flt-1 обращает вспять неоваскуляризацию у крыс, мышей и обезьян.[37][38][39][40]

Фактор пигментного эпителия (PEDF) также действует как ингибитор ангиогенез. Секреция PEDF заметно снижается в условиях гипоксии, что позволяет доминировать эндотелиальной митогенной активности VEGF, что позволяет предположить, что потеря PEDF играет центральную роль в развитии ишемия-приводной НВ. Один клинический результат показывает, что уровни PEDF в скользкий юмор человека уменьшаются с возрастом, что указывает на то, что снижение может привести к развитию AMD.[26][41] В модели на животных AAV с кДНК PEDF человека под контролем промотора CMV предотвращал NV хориоидеи и сетчатки. [42] ( 24).

Это открытие предполагает, что AAV-опосредованная экспрессия ангиостатических факторов может применяться для лечения NV.[43][44] Этот подход может быть полезен в качестве альтернативы частым инъекциям рекомбинантного белка в глаз. Кроме того, PEDF и sFlt-1 могут проникать через склера ткань,[45] позволяя потенциал быть относительно независимым от внутриглазного сайта введения.

Рекомендации

  1. ^ а б Магуайр А. М .; Simonelli F .; Пирс Э. А .; Пью Э. Н .; Мингоцци Ф .; Bennicelli J .; Banfi S .; и другие. (2008). «Безопасность и эффективность переноса генов при врожденном амаврозе Лебера». Медицинский журнал Новой Англии. 358 (21): 2240–2248. Дои:10.1056 / NEJMoa0802315. ЧВК 2829748. PMID 18441370.
  2. ^ Bainbridge J. W. B .; Smith A. J .; Баркер С. С .; Робби С .; Хендерсон Р .; Балагган К .; Вишванатан А .; и другие. (2008). «Влияние генной терапии на зрительную функцию при врожденном амаврозе Лебера». Медицинский журнал Новой Англии. 358 (21): 2231–2239. CiteSeerX 10.1.1.574.4003. Дои:10.1056 / NEJMoa0802268. PMID 18441371.
  3. ^ Hauswirth W. W .; Aleman T. S .; Kaushal S .; Cideciyan A. V .; Schwartz S. B .; Ван Л .; Конлон Т. Дж .; и другие. (2008). «Лечение врожденного амавроза Лебера, вызванного мутациями RPE65 с помощью субретинальной инъекции вектора аденоассоциированного вирусного гена: краткосрочные результаты исследования фазы I». Генная терапия человека. 19 (10): 979–990. Дои:10.1089 / гум.2008.107. ЧВК 2940541. PMID 18774912.
  4. ^ Стигер К., Лерито Э, Мулье П, Роллинг Ф (2009). «AAV-опосредованная генная терапия заболеваний сетчатки на моделях крупных животных». ИЛАР ДЖ. 50 (2): 206–209. Дои:10.1093 / ilar.50.2.206. PMID 19293463.
  5. ^ Ли, JH; Wang, JH; Чен, Дж; Ли, Ф; Эдвардс, TL; Хьюитт, AW; Лю, GS (28 августа 2018 г.). «Генная терапия потери зрения: возможности и проблемы». Прогресс в исследованиях сетчатки и глаз. 68: 31–53. Дои:10.1016 / j.preteyeres.2018.08.003. PMID 30170104.
  6. ^ «Одобренные продукты - Luxturna». Центр оценки и исследований биологических препаратов FDA. 19 декабря 2017.
  7. ^ «Исследование безопасности и эффективности rAAV.sFlt-1 у пациентов с экссудативной возрастной дегенерацией желтого пятна (AMD)». Национальные институты здравоохранения США. Получено 1 июня 2012.
  8. ^ «Исследование безопасности и переносимости AAV2-sFLT01 у пациентов с неоваскулярной возрастной дегенерацией желтого пятна (AMD)». Национальные институты здравоохранения США. Получено 1 июня 2012.
  9. ^ «Первый пациент, прошедший клиническое испытание генной терапии хориидеремии в Великобритании». Фонд Борьба со слепотой. 28 октября 2011 г.. Получено 1 июня 2012.
  10. ^ «Генная терапия слепоты, вызванной хоридеремией». Национальные институты здравоохранения США. Получено 1 июня 2012.
  11. ^ MacLaren, R.E .; Groppe, M .; Barnard, A.R .; Cottriall, C.L .; Толмачева, Т .; Сеймур, Л .; Clark, K. R .; Во время, M. J .; Cremers, F. P. M .; Black, G.C.M .; Lotery, A.J .; Даунс, С. М .; Webster, A.R .; Сибра, М. К. (2014). «Генная терапия сетчатки у пациентов с хориидеремией: первые результаты клинического исследования фазы 1/2». Ланцет. 383 (9923): 1129–37. Дои:10.1016 / S0140-6736 (13) 62117-0. ЧВК 4171740. PMID 24439297.
  12. ^ Билл А. (16 января 2014 г.). «Генная терапия восстанавливает зрение у людей с заболеваниями глаз». Новый ученый. Получено 25 января 2014.
  13. ^ Манкузо К., Хаусвирт В.В., Ли К., Коннор ТБ, Кухенбекер Дж. А., Маук М.С., Нейтц Дж., Нейтц М. (октябрь 2009 г.). «Генная терапия красно-зеленой дальтонизма у взрослых приматов». Природа. 461 (7265): 784–7. Bibcode:2009Натура.461..784M. Дои:10.1038 / природа08401. ЧВК 2782927. PMID 19759534.
  14. ^ Шепли Р. (октябрь 2009 г.). «Видение: генная терапия в цвете». Природа. 461 (7265): 737–9. Bibcode:2009Натура.461..737S. Дои:10.1038 / 461737a. PMID 19812661.
  15. ^ Бенничелли Дж., Райт Дж. Ф., Комароми А., Джейкобс Дж. Б., Хаук Б., Зеленая О. и др. (Март 2008 г.). «Обращение к слепоте на животных моделях врожденного амавроза Лебера с использованием оптимизированного переноса генов, опосредованного AAV2». Молекулярная терапия. 16 (3): 458–65. Дои:10.1038 / sj.mt.6300389. ЧВК 2842085. PMID 18209734.
  16. ^ Ауриккио А., Кобингер Дж., Ананд В., Хильдингер М., О'Коннор Е., Магуайр А. М., Уилсон Дж. М., Беннет Дж. (Декабрь 2001 г.). «Обмен поверхностными белками влияет на клеточную специфичность вирусного вектора и характеристики трансдукции: сетчатка как модель». Молекулярная генетика человека. 10 (26): 3075–81. Дои:10,1093 / чмг / 10,26,3075. PMID 11751689.
  17. ^ а б Lebherz C .; Магуайр А .; Tang W .; Беннет Дж .; Уилсон Дж. М. (2008). «Новые серотипы AAV для улучшенного переноса гена в глаза». Журнал генной медицины. 10 (4): 375–382. Дои:10.1002 / jgm.1126. ЧВК 2842078. PMID 18278824.
  18. ^ Далкара Дениз (2009). «Внутренние ограничивающие мембранные барьеры для AAV-опосредованной трансдукции сетчатки из стекловидного тела». Молекулярная терапия. 17 (12): 2096–2102. Дои:10.1038 / мт.2009.181. ЧВК 2814392. PMID 19672248.
  19. ^ Сеть генной терапии [онлайн]. 2010 [цитируется 30 марта 2010 года]; Доступно с: URL:http://www.asgct.org
  20. ^ Ванденберге Л. Х (2011). «Новые аденоассоциированные вирусные векторы для генной терапии сетчатки». Генная терапия. 19 (2): 162–168. Дои:10.1038 / gt.2011.151. PMID 21993172.
  21. ^ Климчак Р. Р .; Koerber J. T .; Dalkara D .; Фланнери Дж. Г .; Шаффер Д. В. (2009). «Новый аденоассоциированный вирусный вариант для эффективной и селективной интравитреальной трансдукции клеток Мюллера крыс». PLOS ONE. 4 (10): e7467. Bibcode:2009PLoSO ... 4,7467 тыс.. Дои:10.1371 / journal.pone.0007467. ЧВК 2758586. PMID 19826483.
  22. ^ Dalkara D, Kolstad KD, Guerin KI, Hoffmann NV, Visel M, Klimczak RR, Schaffer DV; и другие. (2011). «AAV-опосредованная секреция GDNF из глии сетчатки замедляет дегенерацию сетчатки в модели пигментного ретинита у крыс». Молекулярная терапия. 19 (9): 1602–1608. Дои:10.1038 / мт.2011.62. PMID 21522134.CS1 maint: несколько имен: список авторов (связь)
  23. ^ Беннетт Дж. (2003). «Иммунный ответ после внутриглазной доставки рекомбинантных вирусных векторов». Генная терапия. 10 (11): 977–982. Дои:10.1038 / sj.gt.3302030. PMID 12756418.
  24. ^ Amado D .; Mingozzi F .; Hui D .; Bennicelli J. L .; Wei Z .; Chen Y .; Bote E .; и другие. (2010). «Безопасность и эффективность субретинального повторного введения вирусного вектора крупным животным для лечения врожденной слепоты». Научная трансляционная медицина. 2 (21): 2–16. Дои:10.1126 / scitranslmed.3000659. ЧВК 4169124. PMID 20374996.
  25. ^ Ли Кью, Миллер Р., Хан П.Й., Панг Дж., Динкулеску А., Чиодо В., Хаусвирт, WW (сентябрь 2008 г.). «Внутриглазный путь введения вектора AAV2 определяет гуморальный иммунный ответ и терапевтический потенциал». Молекулярное зрение. 14: 1760–9. ЧВК 2559816. PMID 18836574.
  26. ^ а б c d е ж грамм час я j k л Динкулеску А., Глушакова Л., Мин Ш., Хаусвирт В.В. (июнь 2005 г.). «Аденоассоциированная вирусная генная терапия заболеваний сетчатки». Гм. Джин Тер. 16 (6): 649–63. Дои:10.1089 / hum.2005.16.649. PMID 15960597.
  27. ^ Санфтнер М.Л., Рендаль К.Г., Кироз Д., Койн М., Ладнер М., Мэннинг В.К., Фланнери Дж.Ф. (2001). «Рекомбинантная AAV-опосредованная доставка тет-индуцибельного репортерного гена в сетчатку крысы». Мол Тер. 3 (5): 688–696. Дои:10.1006 / mthe.2001.0308. PMID 11356074.
  28. ^ Пирс Е.А., Эйвери Р.Л., Фоли Е.Д., Айелло Л.П., Смит Л.Э. (январь 1995 г.). «Экспрессия фактора роста эндотелия сосудов / фактора проницаемости сосудов на мышиной модели неоваскуляризации сетчатки». Труды Национальной академии наук Соединенных Штатов Америки. 92 (3): 905–9. Bibcode:1995ПНАС ... 92..905П. Дои:10.1073 / пнас.92.3.905. ЧВК 42729. PMID 7846076.
  29. ^ Кукса В., Иманиши Ю., Баттен М., Пальчевски К., Моис А.Р. (декабрь 2003 г.). «Ретиноидный цикл в сетчатке позвоночных: экспериментальные подходы и механизмы изомеризации». Исследование зрения. 43 (28): 2959–81. Дои:10.1016 / S0042-6989 (03) 00482-6. PMID 14611933.
  30. ^ а б Дрыя Т.П., Ли Т. (1995). «Молекулярная генетика пигментного ретинита». Молекулярная генетика человека. 4 Спецификация №: 1739–43. Дои:10.1093 / hmg / 4.suppl_1.1739. ЧВК 1003020. PMID 8541873.
  31. ^ Фаррар Г.Дж., Кенна П.Ф., Хамфрис П. (март 2002 г.). «О генетике пигментного ретинита и независимых от мутаций подходах к терапевтическому вмешательству». Журнал EMBO. 21 (5): 857–64. Дои:10.1093 / emboj / 21.5.857. ЧВК 125887. PMID 11867514.
  32. ^ Чепко, К. Л. (2012). «Новые генные методы лечения дегенераций сетчатки». Журнал неврологии. 32 (19): 6415–6420. Дои:10.1523 / JNEUROSCI.0295-12.2012. ЧВК 3392151. PMID 22573664.
  33. ^ Ян, Й .; Mohand-Said, S .; Данан, А .; Simonutti, M .; Fontaine, V. R .; Clerin, E .; Picaud, S .; Léveillard, T .; Сахель, Ж. -А. (2009). «Функциональное спасение конуса с помощью белка RdCVF в доминантной модели пигментного ретинита». Молекулярная терапия. 17 (5): 787–795. Дои:10.1038 / мт.2009.28. ЧВК 2835133. PMID 19277021.
  34. ^ а б McGee Sanftner LH, Abel H, Hauswirth WW, Flannery JG (декабрь 2001 г.). «Нейротрофический фактор, полученный из линии глиальных клеток, задерживает дегенерацию фоторецепторов в модели пигментного ретинита у трансгенных крыс». Молекулярная терапия. 4 (6): 622–9. Дои:10.1006 / mthe.2001.0498. PMID 11735347.
  35. ^ Просеивание, П. А .; Caruso, R.C .; Tao, W .; Coleman, H.R .; Томпсон, Д. Дж .; Fullmer, K. R .; Буш, Р. А. (2006). «Цилиарный нейротрофический фактор (CNTF) при дегенерации сетчатки у человека: испытание фазы I CNTF, доставляемой с помощью внутриглазных имплантатов из инкапсулированных клеток». Труды Национальной академии наук. 103 (10): 3896–3901. Bibcode:2006ПНАС..103.3896С. Дои:10.1073 / pnas.0600236103. ЧВК 1383495. PMID 16505355.
  36. ^ Коннолли Д. Т., Хеувельман Д. М., Нельсон Р., Оландер Дж. В., Эппли Б. Л., Дельфино Дж. Дж., Сигель Н. Р., Леймгрубер Р. М., Федер Дж. (Ноябрь 1989 г.). «Фактор сосудистой проницаемости опухоли стимулирует рост эндотелиальных клеток и ангиогенез». Журнал клинических исследований. 84 (5): 1470–8. Дои:10.1172 / JCI114322. ЧВК 304011. PMID 2478587.
  37. ^ Лай Ю.К., Шен В.Й., Бранков М., Лай С.М., Констебль И.Дж., Ракоци ЧП (июнь 2002 г.). «Потенциальное долгосрочное ингибирование глазной неоваскуляризации с помощью генной терапии секреции, опосредованной рекомбинантным аденоассоциированным вирусом». Генная терапия. 9 (12): 804–13. Дои:10.1038 / sj.gt.3301695. PMID 12040462.
  38. ^ Лай С.М., Шен В.Й., Бранков М., Лай Ю.К., Барнетт Н.Л., Ли С.И., Йео И.Й., Матур Р., Хо Дж. Э., Пинеда П., Барати А., Анг С. Л., Констебль И. Дж., Ракоци Е. П. (октябрь 2005 г.). «Долгосрочная оценка AAV-опосредованной генной терапии sFlt-1 для глазной неоваскуляризации у мышей и обезьян». Молекулярная терапия. 12 (4): 659–68. Дои:10.1016 / j.ymthe.2005.04.022. PMID 16023893.
  39. ^ Лай С.М., Эсткурт М.Дж., Викстром М., Химбек Р.П., Барнетт Н.Л., Бранков М., Ти Л.Б., Данлоп С.А., Дегли-Эспости М.А., Ракоци Е.П. (сентябрь 2009 г.). «Генная терапия rAAV.sFlt-1 обеспечивает длительную реверсию неоваскуляризации сетчатки в отсутствие сильного иммунного ответа на вирусный вектор». Исследовательская офтальмология и визуализация. 50 (9): 4279–87. Дои:10.1167 / iovs.08-3253. PMID 19357358.
  40. ^ Rakoczy EP, Lai CM, Magno AL, Wikstrom ME, French MA, Pierce CM, Schwartz SD, Blumenkranz MS, Chalberg TW, Degli-Esposti MA, Constable IJ (декабрь 2015 г.). «Генная терапия рекомбинантными аденоассоциированными векторами для неоваскулярной возрастной дегенерации желтого пятна: 1 год наблюдения в рандомизированном клиническом исследовании фазы 1». Ланцет. 386 (10011): 2395–403. Дои:10.1016 / S0140-6736 (15) 00345-1. PMID 26431823.
  41. ^ Огата Н., Томбран-Тинк Дж., Джо Н., Мразек Д., Мацумура М. (2001). «Повышение уровня фактора пигментного эпителия после лазерной фотокоагуляции». Являюсь. J. Ophthalmol. 132 (3): 427–429. Дои:10.1016 / с0002-9394 (01) 01021-2. PMID 11530069.
  42. ^ Mori K, Duh E, Gehlbach P, Ando A, Takahashi K, Pearlman J, Yang HS, Zack DJ, Ettyreddy D, et al. (2001). «Фактор, полученный из пигментного эпителия, ингибирует неоваскуляризацию сетчатки и хориоидеи». J Cell Physiol. 188 (2): 253–263. Дои:10.1002 / jcp.1114. PMID 11424092.
  43. ^ Apte RS, Barreiro RA, Duh E, Volpert O, Ferguson TA (декабрь 2004 г.). «Стимуляция неоваскуляризации антиангиогенным фактором PEDF». Исследовательская офтальмология и визуализация. 45 (12): 4491–7. Дои:10.1167 / iovs.04-0172. PMID 15557459.
  44. ^ Лай С.М., Эсткурт MJ, Химбек Р.П., Ли С.И., Ю-Сан Йео И, Луу К., Ло Б.К., Ли М.В., Барати А., Виллано Дж., Анг К.Л., ван дер Мост Р.Г., Констебль И.Дж., Дисмуке Д., Самульски Р. Дегли-Эспости М.А., Ракоци Е.П. (октябрь 2012 г.). «Доклиническая оценка безопасности субретинального AAV2.sFlt-1 у нечеловеческих приматов». Генная терапия. 19 (10): 999–1009. Дои:10.1038 / gt.2011.169. PMID 22071974.
  45. ^ Деметриадес А.М., Диринг Т., Лю Х., Лу Л., Гелбах П., Пакер Дж. Д. и др. (Февраль 2008 г.). «Транссклеральная доставка антиангиогенных белков». Журнал глазной фармакологии и терапии. 24 (1): 70–9. CiteSeerX 10.1.1.531.9650. Дои:10.1089 / jop.2007.0061. PMID 18370877.