WikiDer > Антитела из секрета лимфоцитов

Antibodies from lymphocyte secretions

В анализ на антитела из секрета лимфоцитов (БАС) является иммунологический анализ для выявления активных заболеваний, таких как туберкулез, холера, брюшной тиф и т. д. В последнее время проба БАС вызывает одобрение научного сообщества, поскольку она быстро используется для диагностики туберкулеза. Принцип основан на секреции антител из in vivo активированная плазма В-клетки обнаруживаются в кровообращении в течение короткого периода времени в ответ на туберкулезные антигены во время активной туберкулезной инфекции, а не латентной туберкулезной инфекции.

Процедура анализа БАС

PBMC отделяли от крови на Ficoll-Paque дифференциальным центрифугированием и суспендировали в культуральной среде на 24-луночных планшетах для культивирования тканей. Различные разведения PBMC инкубировали при 37 ° C с 5% CO2. Супернатанты культур собирали через 24, 48, 72 и 96 ч после инкубации, и супернатанты тестировали против БЦЖ или PPD с помощью ELISA. Титр ELISA указывает на положительный или отрицательный результат.[1]

Преимущества анализа БАС в диагностике туберкулеза

Диагностика туберкулеза наиболее сложна. Стандартный диагноз для больного туберкулезом: мокрота на основе культуры. Но посев нужно 6-8 недель с 10-20% ложноположительных результатов.[2] Клиницистам будет полезен экспресс-серологический тест для диагностики, отслеживания активности заболевания и ответа на терапию.[3][4] Кожная проба с очищенным производным белка (PPD) (Проба Манту) является важным инструментом диагностики латентной инфекции и заболевания туберкулезом в развитом мире, но имеет низкую прогностическую ценность в Bacillus Calmette-Guérin (БЦЖ) - вакцинированы отдельных лиц, а также лиц, проживающих в районах, эндемичных по ТБ. Низкая прогностическая ценность является результатом перекрестной реактивности с BCG и атипичные микобактерии, а также ложноотрицательные реакции у детей с недостаточным питанием.[5][6] БЦЖ использовалась в качестве антигена в ИФА в исследованиях in vitro для определения активности заболевания, но ее использование было приостановлено из-за трудностей в интерпретации, проблем с дифференциацией активного или прошедшего заболевания и низкого чувствительность и специфичность.[7][8][9] Антитела из анализа секреции лимфоцитов (ALS) ранее использовались для обнаружения специфического ответа антител после пероральной вакцинации убитой вакциной против холеры у здоровых взрослых без какой-либо потребности в стимуляции антигеном in vitro.[10]

Основные преимущества:

  • Высокая чувствительность> 93%[11]
  • Раннее выявление активного туберкулеза
  • Этот метод не требует взятия пробы с места заболевания, он также может быть полезен при диагностике малобациллярного детского туберкулеза.
  • Секретированные антитела можно хранить в течение длительного времени для дальнейшего анализа.

Ловушки

Этот метод нельзя применить, если Проба Манту (туберкулиновая кожная проба) проводилась в течение последних 40 дней, потому что это может помешать результатам теста ALS. Этот тест используется как дополнительный тест к другим тестам, например рентгенограмма грудной клетки, СОЭ, CRP, история контактов с активным больным туберкулезом, неэффективность традиционного лечения антибиотиками и т.д .; противотуберкулезная терапия не проводится, если только тест на БАС положительный. Причина в том, что этот метод потенциально является ранним биомаркером активной инфекции. Однако, если у субъекта нет никаких физических симптомов, врачи не могут назначить противотуберкулезное лечение.

Рекомендации

  1. ^ Р. Ракиб, Дж. Рахман, А. К. Камалуддин, С. М. Камаль, Ф. А. Бану, С. Ахмед, З. Рахим, П. К. Бардхан, Дж. Андерссон и Д. А. Сак. 2003. Быстрая диагностика активного туберкулеза путем выявления антител из секрета лимфоцитов. J. Infect. Дис. 188: 364–370
  2. ^ Котадиа С.Н., Дешмук С.Н., Саоджи А.М. Оценка прямой микроскопии как скринингового теста в диагностике туберкулеза легких. Индийский журнал J Pathol Microbiol 1990; 33: 68–73.
  3. ^ Аль-Хаджадж М.С., Гад-эль-Раб М.С., Аль-Орейни И.О., Аль-Кассими Ф.А. Повышенная чувствительность для выявления случаев туберкулеза с помощью модифицированного теста Anda-TB ELISA. Tuber Lung Dis 1999; 79: 181–5.
  4. ^ Йилмаз А., Эче Ф., Байрамгурлер Б., Аккая Е., Баран Р. Значение Ca125 в оценке активности туберкулеза. Респир Мед 2001; 95: 666–9.
  5. ^ Huebner RE, Schein MF, Bass JB Jr. Туберкулиновая кожная проба. Clin Infect Dis 1993; 17: 968–75.
  6. ^ Дональд ПР. Детский туберкулез. Curr Opin Pulm Med 2000; 6: 187–92.
  7. ^ Дханд Р., Гангули Н.К., Вайшнави К., Гилхотра Р., Малик С.К. Ложноположительные реакции с иммуноферментным анализом антигенов Mycobacterium tuberculosis в плевральной жидкости. J Med Microbiol 1988; 26: 241–3.
  8. ^ Ван Ч.Р., Лю М.Ф., Чен М.Ю., Линь Т.П., Ченг С.С., Чуанг С.Ю. Иммуноферментный анализ с использованием ультразвукового антигена БЦЖ для диагностического потенциала микобактериальной инфекции на Тайване. Чжунхуа Минь Го Вэй Шэн У Цзи Миан И Сюэ За Чжи 1989; 22: 97–104
  9. ^ Лу Ц.З., Цяо Дж., Шен Т., Линк Х. Ранняя диагностика туберкулезного менингита путем обнаружения клеток, секретирующих БЦЖ, в спинномозговой жидкости. Lancet 1990; 336: 10–3.
  10. ^ Чанг Х.С., Мешок Д.А. Разработка нового анализа in vitro (анализа ALS) для оценки индуцированной вакциной секреции антител из циркулирующих лимфоцитов слизистой оболочки. Clin Diagn Lab Immunol 2001; 8: 482–8.
  11. ^ Быстрая диагностика активного туберкулеза путем обнаружения антител в секрете лимфоцитов Р. Ракиб, Дж. Рахман, АКМ Камалуддин,… - Журнал…, 2003 - UChicago Press