WikiDer > NE-tag - Википедия

NE-tag - Wikipedia

В NE-тег синтетический пептид тег (тег NE) выполнен в виде эпитоп тег для обнаружения, количественного определения и очистки рекомбинантного белка. Эта запатентованная пептидная последовательность состоит из восемнадцати гидрофильный аминокислоты. Этот короткий пептид не имеет значительной гомологии с какими-либо существующими белками, встречающимися в природе. Этот синтетический пептид NE принимает конформацию случайной спирали и демонстрирует сильную иммуногенность (вычислительное предсказание). Это выгодно, поскольку обеспечивает строгую специфичность к белкам, меченным NE, которые легко обнаруживаются, количественно оцениваются и очищаются.[1]

Обнаружение

NE-tag может быть специфически детектирован с использованием моноклонального анти-NE детектирующего антитела - аффинно очищенного мышиного иммуноглобулина IgG1, который специфически связывается с NE-меченными белками. Эта конъюгация пептидов с антителами подтверждена в Вестерн-блоттинг, иммунопреципитация (IP), иммуноцитохимия (IHC) и аффинная очистка слитых белков NE (т.е. аффинная колонка).[2][3]

Последовательности

  • Последовательность ДНК NE-tag выглядит следующим образом: 5 'ACC AAA gAA AAC CCg CgT AgC AAC Cag gAA gAA AgC TAT gAT gAT AAC gAA AgC 3'
  • Соответствующая аминокислотная последовательность: TKENPRSNQEESYDDNES (Thr-Lys-Glu-Asn-Pro-Arg-Ser-Asn-Gln-Glu-Glu-Ser-Tyr-Asp-Asp-Asn-Glu-Ser)

Патенты

Рекомендации

  1. ^ Хо, Филип У.Л .; Tse, Zero HM .; Лю, HF .; Lu, S .; Хо, Джессика WM .; Кунг, Мишель HW .; Рамсден, Дэвид Б .; Хо, SL. (2013). «Оценка клеточной эстрогенной активности на основе опосредованного рецептором эстрогена снижения экспрессии растворимой формы катехол-O-метилтрансферазы (COMT) в системе на основе ELISA». PLoS ONE. 8 (9): e74065. Дои:10.1371 / journal.pone.0074065. ЧВК 3765251. PMID 24040167.
  2. ^ Це, ВЧ .; Ho, JC .; Choi, SW .; Ли, Ю.К .; Батлер, AW .; Ng, KM .; Сиу, CW .; Симпсон, Массачусетс .; Lai, WH .; Chan, YC .; Au, кВт .; Zhang, J .; Lay, кВт .; Эстебан, Массачусетс .; Nicholls, JM .; Colman, A .; Шам, ПК. (2013). «Кардиомиоциты, полученные из индуцированных плюрипотентных стволовых клеток, специфичных для пациента, воспроизводят патогенные фенотипы дилатационной кардиомиопатии благодаря новой мутации DES, идентифицированной с помощью секвенирования всего экзома». Молекулярная генетика человека. 22 (7): 1395–1403. Дои:10.1093 / hmg / dds556. PMID 23300193.
  3. ^ Xu, EG .; Хо, Филип У.Л .; Tse, Zero HM .; Ho, SL .; Люнг, КМ. (2016). «Выявление экологических рисков, связанных с приоритетными химическими веществами, нарушающими эндокринную систему, в четырех охраняемых морских районах Гонконга посредством комплексного подхода». Загрязнение окружающей среды. 215: 103–112. Дои:10.1016 / j.envpol.2016.04.090. PMID 27179329.