WikiDer > Тропомиозин

Tropomyosin
Тропомиозин
1C1G Кристалл тропомиозина.png
PDB: 1C1G​
Идентификаторы
СимволТропомиозин
PfamPF00261
ИнтерПроIPR000533
PROSITEPDOC00290
SCOP22tma / Объем / СУПФАМ

Тропомиозин представляет собой двухцепочечный альфа-спиральный спиральная катушка белок содержится в актиновой основе цитоскелеты.

Тропомиозин и актиновый скелет

Все организмы содержат органеллы, которые обеспечивают физическую целостность их клеток. Органеллы этого типа известны под общим названием цитоскелет, и одна из самых древних систем основана на нитчатых полимерах белка. актин. Полимер второго белка, тропомиозина, является неотъемлемой частью большинства актиновых филаментов у животных.

Тропомиозины представляют собой большое семейство интегральных компонентов актиновых филаментов, которые играют критическую роль в регулировании функции актиновых филаментов как в мышечных, так и в немышечных клетках. Эти белки состоят из гетеро- или гомо-спиральных стержневидных спиралей.димеры что лежат вдоль α-спиральная канавка большинства актиновых филаментов. Взаимодействие происходит по длине актинового филамента, при этом димеры выравниваются по типу голова к хвосту.

Тропомиозины часто делятся на две группы: мышечный тропомиозин. изоформы и немышечные изоформы тропомиозина. Изоформы мышечного тропомиозина участвуют в регуляции взаимодействий между актином и миозин в мышце саркомер и играть ключевую роль в регулируемых сокращение мышц. Немышечные изоформы тропомиозина функционируют во всех клетках, как мышечных, так и немышечных, и участвуют в ряде клеточных путей, которые контролируют и регулируют клеточные процессы. цитоскелет и другие ключевые клеточные функции.

Система актиновых нитей, которая участвует в регулировании этих клеточных путей, более сложна, чем системы актиновых нитей, которые регулируют сокращение мышц. Сократительная система опирается на 4 изоформы актиновых филаментов и 5 изоформ тропомиозина,[1] тогда как система актиновых филаментов цитоскелета использует две изоформы актиновых филаментов и более 40 изоформ тропомиозина.[1][2]

  • Тропомиозин связан с actin.png
  • Тропомиозин не связан с actin.png

Изоформы и эволюция

В прямом отличие от 'one ген, один полипептид'правило, теперь мы знаем из комбинации геномное секвенирование, такой как Проект "Геном человека" и стандартное восточное время данные экспрессируемых белков, что многие эукариоты производят ряд белков из одного гена. Это играет решающую роль в функционировании высших эукариот, поскольку люди экспрессируют более чем в 5 раз больше различных белков (изоформ) через альтернативное сращивание чем у них есть гены. С механистической точки зрения организму намного проще расширить существующее семейство генов / белков (создавая изоформы белков), чем создать совершенно новый ген. С эволюционной точки зрения тропомиозины у высших эукариот являются примечателен сохранением всех 4 потенциальных генов, образованных в результате двойной геномной дупликации, имевшей место на ранней стадии эволюции эукариот.[3]

Гены и изоформы (сложность изоформ)

Внешний образ
значок изображения Ганнинг и др. 2005 г., Рисунок 1.

Альтернативный сплайсинг генерирует множественные продукты за счет использования альтернативных промоторов, что приводит к различным аминоконцам, взаимоисключающему внутреннему сплайсингу 6a по сравнению с 6b и альтернативным карбоксильным концам. Цветовая кодировка используется для обозначения того, что экзон 1a, например, из гена α-тропомиозина, больше похож на экзон 1a из генов β-тропомиозина и α3-тропомиозина, чем на альтернативный N-концевой экзон 1b из генов Ген α-тропомиозина. Показаны не все изоформы, полученные из этих генов, хотя их существование подтверждено Нозерн-блоттингом. В большинстве случаев изоформы, возникающие в результате альтернативного сплайсинга, не содержат экзон, уникальный только для одной изоформы. Скорее, изоформы получают свою индивидуальность за счет уникальной комбинации экзонов.[2]

У млекопитающих четыре гена ответственны за создание более 40 различных изоформ тропомиозина. По структуре гены очень похожи, что позволяет предположить, что они возникли в результате дупликация гена наследственного гена. У людей эти гены больше не связаны и широко рассредоточены. У человека гены α1-, β-, α3- и α4 формально известны как TPM1, TPM2, TPM3, и TPM4 и расположены по адресу 15q22,[4] 9п13,[5] 1q22[6] и 19п13,[7] соответственно. Альтернативная номенклатура называет четыре гена (α, β, γ, δ).[2]

Изоформы определяются как тесно связанные генные продукты, которые выполняют, по сути, сходные биологические функции, с вариациями, существующими между изоформами с точки зрения биологической активности, регуляторных свойств, временной и пространственной экспрессии и / или межклеточного местоположения. Изоформы образуются с помощью двух различных механизмов: дупликации генов и альтернативного сплайсинга. Первый механизм - это процесс, при котором несколько копий гена генерируются посредством неравного кроссинговера, тандемной дупликации или транслокации. Альтернативный сплайсинг - это механизм, при котором экзоны либо сохраняются в мРНК, либо нацелены на удаление в различных комбинациях для создания разнообразного набора мРНК из одной пре-мРНК.

Сращивание

Огромный спектр изоформ тропомиозина генерируется с помощью комбинации различных генов и альтернативного сплайсинга.[8] У млекопитающих, независимо от гена, транскрипция инициируется в начале либо экзона 1a, либо экзона 1b. В зависимости от того, какой промоутер и начальный экзон, изоформы тропомиозина можно отнести к одной из двух категорий:молекулярный вес (HMW, 284 аминокислоты) или низкомолекулярные (LMW, 248).[1][9] Изоформы HMW экспрессируют экзон 1a и либо 2a, либо 2b, тогда как изоформы LMW экспрессируют экзон 1b.[9] На сегодняшний день все известные тропомиозины содержат экзоны 3-9. Альтернативный сплайсинг может происходить в экзоне 6 с взаимоисключающим выбором экзона 6a или 6b.[10] На c-конце транскрипт снова сплайсируется на экзоне 9 с выбором экзона 9a, 9b, 9c или 9d.[10]

Эволюция поколения изоформ

С точки зрения структуры гены очень похожи, что позволяет предположить, что они возникли в результате дупликации гена предкового гена. Наиболее родственными генами являются α- и γ-гены, использующие два промотора и различающиеся только наличием уникального экзона 2a в α-гене.[11][12] Хотя при сравнении последовательностей были выявлены существенные различия между альтернативными экзонами одного и того же гена (1a и 1b, 6a и 6b, а также экзон 9s), большинство экзонов, тем не менее, высоко консервативны между разными генами.[1][8][13][14] Например, экзоны 1a и 1b из α-гена значительно различаются по последовательности; однако последовательность экзона 1a α-, β-, γ- и δ-генов высококонсервативна.

Из-за консервативного характера генов считается, что гены произошли от общего предкового гена, дав начало более 40 функционально различным изоформ. Экспрессия этих изоформ строго регулируется и варьируется на протяжении всего развития. Разнообразие экспрессии тропомиозина, как в пространстве, так и во времени, обеспечивает потенциал не только для регулирования функции актиновых филаментов, но и для создания специализированных популяций актиновых филаментов.[3]

Пространственная сортировка изоформ тропомиозина

Многочисленные отчеты подробно описывают, что изоформы тропомиозина отсортированы по разным внутриклеточным местоположениям, часто ассоциируясь с популяциями актиновых филаментов, которые участвуют в определенных процессах.[15][16][17][18] Прямая визуализация пространственной сегрегации изоформ первоначально наблюдалась Бургойном и Норманом, а вскоре после этого Лин и соавторами.[18][19][20] Они заметили, что определенные изоформы были связаны с различными клеточными структурами.[18] Используя специфические антитела, они смогли идентифицировать присутствие как HMW, так и LMW изоформ γ-гена в стрессовых волокнах; однако только изоформы LMW были обнаружены в взъерошенные мембраны.[18]

Эти исследования были распространены на ряд типов клеток с аналогичными результатами. Обширные исследования нейрональных клеток,[21] фибробласты,[16][17][22] скелетные мышцы[23][24] и остеокласт клетки дополнительно подчеркнули сложную ассоциацию изоформ тропомиозина с клеточными структурами. Эти исследования привели к пониманию того, что регулирование сортировки изоформ является чрезвычайно сложным и строго регулируемым.

Регулирование сортировки

Сортировка изоформ тропомиозина в дискретных внутриклеточных местах регулируется в процессе развития. Первоначальные исследования показали, что сортировка изоформ изменилась в процессе развития, когда тропомиозин 4 изначально был локализован в конус роста растущих нейронов, но в зрелых нейронах он перемещается в соматодендритный компартмент.[25] Эти наблюдения были подтверждены исследованиями различных изоформ тропомиозина, показывающими, как популяции тропомиозина перемещались во время созревания нейронов. Эти данные подтверждают мнение о том, что изоформы тропомиозина подвержены временной регуляции.

Дополнительные исследования выявили роль клеточного цикла в сортировке изоформ. Исследование, в котором проводился скрининг ряда продуктов HMW из α- и β-генов и сравнивалась локализация с продуктами LMW из γ-гена, показало, что продукты HMW и LMW взаимно исключают друг друга на ранней стадии. Фаза G1 клеточного цикла.[17]

Механизм сортировки

Хотя исследования показывают, что на сортировку тропомиозина может влиять сортировка мРНК,[21] абсолютной корреляции между мРНК и местоположением белка нет. В нейронах было обнаружено, что мРНК тропомиозина 5NM1 сортируется на полюс нейрона, вырабатывающего аксон до морфологической дифференцировки.[26] Сортировка мРНК тропомиозина 5NM1 / 2 в это место коррелировала с экспрессией белка тропомиозина 5NM1 / 2. Напротив, мРНК, кодирующая белок Tropomyosin Br2, была исключена из полюса нейрона.[26]

Связь между сортировкой мРНК и локализацией белка была протестирована на моделях трансгенных мышей. Модели были созданы так, чтобы кодирующие области тропомиозина 5NM1 / 2 и тропомиозина 3 экспрессировались под контролем промотора β-актина с нетранслируемой областью β-актина, лишенной информации о нацеливании.[27] Исследование показало, что тропомиозин 3, изоформа, которая обычно не экспрессируется в нейрональных клетках, широко распределяется по нейрону, в то время как экзогенная экспрессия нейрональной изоформы тропомиозина 5NM1 / 2 сортируется по конусу роста нейронов, как и эндогенная Тропомиозин 5НМ1 / 2. Поскольку эти два трансгена различаются только в кодирующей области тропомиозина, но локализованы в двух разных областях, полученные данные свидетельствуют о том, что помимо сортировки мРНК сами белки содержат информацию для сортировки.

Исследования показывают, что на сортировку изоформ тропомиозина также может влиять изоформный состав актина микрофиламентов.[27] В миобластах избыточная экспрессия γ-актина приводит к подавлению β-актина и удалению тропомиозина 2, но не тропомиозина 5 из стрессовых волокон.[28] Позже было обнаружено, что, когда клетки подвергались воздействию цитохалазина D, химического вещества, которое приводит к дезорганизации актиновых филаментов, сортировка изоформ тропомиозина была нарушена. После вымывания цитохалазина D сортировка изоформ тропомиозина была восстановлена.[29] Это указывает на сильную взаимосвязь между процессом сортировки изоформ тропомиозина и включением изоформ тропомиозина в организованные массивы актиновых филаментов. Нет данных об активном транспорте изоформ тропомиозина в определенные места. Скорее, похоже, что сортировка является результатом локальной сборки предпочтительных изоформ в конкретном внутриклеточном сайте. Механизмы, лежащие в основе сортировки изоформ тропомиозина, по-видимому, по своей природе гибкие и динамичные по своей природе.

Изоформы не являются функционально избыточными

Многие исследования привели к пониманию того, что тропомиозины выполняют важные функции и необходимы для самых разных видов, от дрожжей, червей и мух до сложных млекопитающих.

Существенная роль тропомиозинов была обнаружена в лаборатории Бретчера, где исследователи обнаружили, что за счет устранения гена TPM1 почкующихся дрожжей скорость роста была снижена, присутствие актиновых кабелей исчезло, наблюдались дефекты везикулярного транспорта и спаривание дрожжей. был беден.[30] Когда второй дрожжевой ген, TPM2, был удален, никаких наблюдаемых изменений фенотипа зарегистрировано не было; однако при удалении вместе с TPM1 это привело к летальному исходу. Это предполагает, что гены TPM1 и -2 выполняют перекрывающуюся функцию; однако TPM2 не может полностью компенсировать потерю TPM1, что указывает на то, что некоторые функции TPM1 уникальны. Подобные результаты наблюдались у мух, червей, амфибий и млекопитающих, подтверждая предыдущие результаты и предполагая участие тропомиозина в широком спектре клеточных функций. Однако три коэкспрессируемых гена TMP1, 2 и 4 не могут компенсировать делецию гена TPM3 в эмбриональных стволовых клетках и доимплантационных эмбрионах мыши.

Результаты экспериментов с нокаутом генов могут быть неоднозначными и должны быть тщательно изучены. В исследованиях, в которых делеция гена приводит к летальному исходу, сначала может показаться, что продукт гена играет действительно уникальную роль. Однако летальность также может быть результатом неспособности скомпрометированной клетки экспрессировать другие изоформы для восстановления фенотипа, поскольку требуемая изоформа не экспрессируется в клетке естественным образом.

Конкретные роли и функции

Влияние на связывание актин-связывающих белков с актиновыми филаментами

Актиновая микрофиламентная система - это фундаментальная система цитоскелета, участвующая в развитии и поддержании морфологии клеток. Способность этой системы легко реагировать на клеточные сигналы и подвергаться структурной реорганизации привела к убеждению, что эта система регулирует определенные структурные изменения в различных клеточных регионах.

У человека существует только шесть изоформ актина, и эти изоформы отвечают за множество уникальных и сложных клеточных структур и ключевых клеточных взаимодействий. Считается, что функция и форма актинового цитоскелета в значительной степени контролируются актин-связывающие белки (ABP), которые связаны с полимером актина. ABP - это группа белков, которые связываются с актином. Хотя тропомиозин иногда включается как АД, это не истинное АД. Димер тропомиозина имеет очень низкое сродство к актиновой нити и не образует ван-дер-ваальсовых контактов с актином. Только образование намотки полимера тропомиозина вокруг актиновой нити обеспечивает стабильность взаимодействия тропомиозин-актиновая нить.

Многие исследования показывают, что связывание изоформ тропомиозина с актиновым филаментом может влиять на связывание других ABP, которые вместе изменяют структуру и передают специфические свойства и, в конечном счете, специфические функции актиновому филаменту. Это продемонстрировано на нейроэпителиальных клетках, где повышенная экспрессия тропомиозина 5NM1 увеличивает рекрутирование миозина IIB, моторного белка миозина, в область конуса роста.[31] Однако сверхэкспрессия тропомиозина Br3 имела противоположный эффект, снижая активность миозина в той же области.

В новаторском исследовании Бернштейна и Бамбурга было замечено, что актин-связывающий белок фактор деполимеризации актина (ADF) /кофилин, фактор, который способствует деполимеризации актинового филамента, конкурирует с тропомиозином за связывание с актиновым филаментом.[32] Экспрессия тропомиозина 5NM1 в нейрональных клетках устраняет ADF / кофилин из области конуса роста, что приводит к более стабильным актиновым филаментам.[31] Однако наблюдалась повышенная экспрессия Tropomyosin Br3 для рекрутирования ADF / cofilin в актиновые филаменты, связанные с изоформой Tropomyosin Br3 в ламеллиподии, что привело к разборке актиновых филаментов.[31] Этот феномен, при котором конкретная изоформа тропомиозина управляет определенными взаимодействиями между актин-связывающими белками, а актиновый филамент наблюдается в различных модельных системах с рядом различных связывающих белков (обзор у Gunning et al., 2008[10]). Эти взаимодействия под влиянием изоформ тропомиозина позволяют актиновым филаментам участвовать в разнообразном диапазоне клеточных функций.

Функция сокращения скелетных мышц

Скелетные мышцы состоит из крупных, многоядерных клеток (мышечные волокна). Каждое мышечное волокно заполнено продольными массивами миофибриллы. Миофибриллы состоят из повторяющихся белковых структур или саркомеры, основная функциональная единица скелетных мышц. Саркомер представляет собой высокоструктурированный протеиновый массив, состоящий из пересекающихся толстых и тонких нитей, где тонкие нити привязаны к структуре протеина, т.е. Z-линия. Динамическое взаимодействие между толстыми и тонкими нитями приводит к сокращению мышц.

Миозин принадлежит к семейству моторных белков, и мышечные изоформы этого семейства составляют толстую нить. Тонкая нить состоит из изоформ актина скелетных мышц. Каждый миозиновый белок «движется» по тонкой актиновой нити, неоднократно связываясь с миозин-связывающими участками вдоль актиновой нити, сдвигаясь и отпуская. Фактически, толстая нить накала движется или скользит по тонкой нити, в результате чего сокращение мышц. Этот процесс известен как модель скользящей нити.

Связывание головок миозина с актином мышц - это строго регулируемый процесс. Тонкая нить состоит из актина, тропомиозина и тропонина. Сокращение скелетных мышц вызывается нервными импульсами, которые, в свою очередь, стимулируют высвобождение кальция.2+. Выпуск Ca2+ от саркоплазматический ретикулум вызывает повышение концентрации Са2+ в цитозоле. Затем ионы кальция связываются с тропонином, который связан с тропомиозином. Связывание вызывает изменения в форме тропонина и впоследствии заставляет изоформу тропомиозина сдвигать свое положение на актиновой нити. Это смещение позиции обнажает миозин-связывающие сайты на актиновой нити, позволяя миозиновым головкам толстой нити связываться с тонкой нитью.

Структурные и биохимические исследования показывают, что положение тропомиозина и тропонина на тонком филаменте регулирует взаимодействия между миозиновыми головками толстого филамента и сайтами связывания на актине тонкого филамента. дифракция рентгеновских лучей и криоэлектронная микроскопия предполагают, что тропомиозин стерически блокирует доступ миозина к актиновой нити.

Хотя эта модель хорошо известна, неясно, вызывает ли движение тропомиозина прямое взаимодействие головки миозина с актиновым филаментом. Таким образом, появилась альтернативная модель, согласно которой движение тропомиозина в филаменте функционирует как аллостерический переключатель, который модулируется путем активации связывания миозина, но не функционирует исключительно за счет регулирования связывания миозина.

Регулирование сокращения гладких мышц

Гладкая мышца представляет собой тип без поперечно-полосатой мышцы, и в отличие от поперечно-полосатой мышцы сокращение гладких мышц не находится под сознательным контролем. Гладкая мышца может сокращаться спонтанно или ритмично и вызываться рядом физико-химических агентов (гормоны, лекарства, нейротрансмиттеры). Гладкая мускулатура находится в стенках различных органов и трубок тела, таких как пищевод, желудок, кишечник, бронхи, уретра, мочевой пузырь и кровеносные сосуды.

Хотя гладкие мышцы не образуют регулярных массивов толстых и тонких нитей, таких как саркомеры поперечно-полосатых мышц, сокращение все же происходит из-за того же механизма скольжения нитей, контролируемого поперечными мостиками миозина, взаимодействующими с актиновыми филаментами. Тонкая нить гладкой мускулатуры состоит из актина, тропомиозина, Caldesmon, и кальмодулин. В этом типе мышц кальдесмон и кальмодулин контролируют опосредованный тропомиозином переход между включенным и выключенным состояниями активности. Кальдесмон связывается с актином, тропомиозином, кальмодулином и миозином, из которых наиболее важны его взаимодействия с актином. На связывание кальдесмона сильно влияет тропомиозин. Кальдесмон является ингибитором актиномиозиновой АТФазы и подвижности, и как связывание актина, так и ингибирование кальдесмона значительно усиливаются в присутствии тропомиозина.

Сокращение гладких мышц инициируется высвобождением Са2+. Ca2+ связывается и активирует кальмодулин, который затем связывается с кальдесмоном. Это связывание заставляет белок кальдесмона отделяться от актинового филамента, обнажая миозин-связывающие участки на актиновом филаменте. Моторные головки миозина фосфорилируются киназа легкой цепи миозина, позволяя миозиновой головке взаимодействовать с актиновой нитью и вызывать сокращение.

Роль в функции цитоскелета

Цитоскелет представляет собой сложную сеть нитей, необходимых для правильного функционирования ряда клеточных процессов, включая подвижность клеток, деление клеток, внутриклеточный транспорт и поддержание формы клетки. Цитоскелет состоит из трех различных систем филаментов: микротрубочек, промежуточных филаментов и микрофиламентов (также известных как актиновый цитоскелет). Именно динамические взаимодействия между этими филаментами наделяют клетки уникальными структурами и функциями.

Ряд регуляторных механизмов, использующих многие актин-связывающие белки, эволюционировали, чтобы контролировать динамику системы актиновых филаментов. Считается, что тропомиозины играют ключевую роль в этой регуляторной системе, влияя на ассоциации актинового филамента с другими ABP. Вместе эти ассоциации наделяют филамент специфическими свойствами, позволяя этим структурам участвовать в широком спектре клеточных процессов, а также быстро реагировать на клеточные стимулы.

Роль в болезнях

Рак

Многие исследования показали, что существуют определенные изменения в репертуаре тропомиозинов, экспрессируемых в клетках, которые подвергаются клеточной трансформации. Эти хорошо воспроизводимые результаты предполагают, что во время процесса клеточной трансформации, процесса, при котором нормальная клетка становится злокачественной, происходит снижение синтеза изоформ HMW тропомиозина. В начальных исследованиях трансформация линии клеток фибробластов эмбриона крысы REF-52 и нормальных клеток почек крысы приводила к снижению синтеза тропомиозинов HMW.[33][34][35] В обеих этих системах подавление регуляции способствовало снижению уровней мРНК. Эти ранние результаты предполагают, что тропомиозины играют критическую роль в облегчении определенных процессов, которые происходят во время трансформации клеток, таких как реорганизация актиновых филаментов и изменения формы клеток. Эти исследования были воспроизведены в других лабораториях и на других клеточных линиях с аналогичными результатами (обзор в Gunning et al., 2008[10]).

Кроме того, исследования выявили связь между экспрессией изоформы тропомиозина и приобретением метастатических свойств. В исследовании сравнивалась экспрессия изоформ между клеточной линией карциномы легких Льюиса с низким и высоким уровнем метастазов.[36][37] Исследование показало, что по мере того, как клетки становятся более метастатическими, наблюдается заметное снижение экспрессии белка тропомиозина 2 HMW и уровней мРНК.

Эти результаты были подтверждены на первичных опухолях и на моделях человека. Исследования рака толстой кишки и мочевого пузыря обнаружили повышенную экспрессию тропомиозина LMW. Тропомиозин 5НМ1.[38][39] Повышенная экспрессия этой изоформы также наблюдалась в трансформированных фибробластах крыс, и считается, что эта изоформа необходима для подвижности высокометастатической меланомы.[40] Кроме того, повышенная экспрессия тропомиозина 4 связана с метастазированием в лимфатические узлы при раке груди.

Все эти исследования показывают, что изменения в экспрессии и составе изоформ тропомиозина являются неотъемлемой частью рака и его прогрессирования. Консенсус состоит в том, что в целом раковые клетки становятся более зависимыми от низкомолекулярных тропомиозинов, поскольку высокочастотные тропомиозины исчезают с увеличением злокачественности.[10] Это открытие привело к разработке новых соединений антитропомиозина в качестве потенциальных противораковых агентов.

Аутоиммунитет

Тропомиозины вовлечены в аутоиммунное заболевание язвенный колит, заболевание толстой кишки, характеризующееся язвами или открытыми язвами. Связь между этим заболеванием и тропомиозином была впервые подтверждена в исследовании, которое обнаружило, что сыворотка крови, взятая у 95% пациентов с язвенным колитом, содержала антитела, которые положительно реагировали на тропомиозин.[41] Дополнительные исследования подтвердили эти результаты, но также идентифицируют тропомиозин 5 и тропомиозин 1 как основные тропомиозины, участвующие в патогенезе язвенного колита.[42][43] Тропомиозин 5 был связан с развитием поучита в подвздошной кишке после операции по поводу язвенного колита. Повышенное количество IgG-продуцирующих клеток в слизистой оболочке толстой кишки пациентов с язвенным колитом в значительной степени способствует продуцированию IgG против эпитопов, связанных с тропомиозином 5. Следовательно, тропомиозин 5 способен вызывать значительный Т-клеточный ответ.[44] Физико-химический анализ общих структурных мотивов, присутствующих в 109 аутоантигенах человека, показал, что тропомиозины имеют наибольшее количество таких мотивов и, следовательно, очень высокую склонность действовать как аутоантигены.[45]

Помимо той роли, которую тропомиозины играют при язвенном колите, сообщалось также о наличии антител к тропомиозину при остром заболевании. ревматическая лихорадка[46] и воспалительное заболевание Синдром Бехчета.[47] В обоих случаях неясно, играют ли эти антитела прямую роль в патогенезе этих состояний человека или отражают высокую антигенность тропомиозинов, высвобождаемых из поврежденных клеток.

Мышечные заболевания

Немалиновая миопатия - это мышечное заболевание, которое характеризуется наличием электронно-плотных стержневых тел в волокнах скелетных мышц. Эти электронно-плотные стержневые тела состоят в основном из α-актинина и актина. Расстройство часто клинически классифицируется на несколько групп, включая легкие (типичные), промежуточные, тяжелые и взрослые; однако эти различия несколько неоднозначны, поскольку категории часто пересекаются. Причинные мутации были обнаружены в скелетном α-актинине, тропомиозине, небулине и тропонине. У людей были идентифицированы мутации как в генах γ-тропомиозина, так и в генах β-тропомиозина. Никаких мутаций в гене α-тропомиозина в этом состоянии у людей не выявлено.

Аллергия

«Моллюски» включают ракообразные и моллюски. Тропомиозин - это белок, который в первую очередь отвечает за аллергию на моллюсков.[48][49][50][51]

Тропомиозин также вызывает некоторые случаи таракан аллергия.[52]

Инструменты и технологии для изучения тропомиозинов

Антитела

В научном сообществе существует большой интерес к изоформам тропомиозина, и, учитывая широкий спектр процессов, в которых, как сообщается, участвует этот белок, это неудивительно.

Одним из способов детального изучения этого белка и, что более важно, конкретных изоформ, является использование антител. Эти специфические антитела можно использовать в экспериментах по белковому блоттингу и наносить на клетки или срезы тканей и наблюдать под микроскопом. Это позволяет исследователям не только определять уровень или концентрацию изоформы или группы изоформ, но также определять клеточное местоположение конкретной изоформы и ассоциации с другими клеточными структурами или белками.

В настоящее время имеется много коммерчески доступных антител; однако многие из этих антител продаются с минимальной информацией относительно антигена, используемого для повышения уровня антител, и, следовательно, специфичности изоформы, поскольку некоторые исследовательские группы разрабатывают свои собственные антитела. Прежде чем эти антитела можно будет использовать, их необходимо тщательно охарактеризовать, в ходе которого исследуется специфичность антитела, чтобы гарантировать, что антитело не вступает в перекрестную реакцию с другими тропомиозинами или другими белками.

Рекомендации

  1. ^ а б c d Питтенгер, М.Ф .; Kazzaz, JA; Хельфман Д.М. (1994). «Функциональные свойства немышечного тропомиозина». Curr Opin Cell Biol. 6 (1): 96–104. Дои:10.1016/0955-0674(94)90122-8. PMID 8167032.
  2. ^ а б c Ганнинг, PW; Шевцов, Г; Ки, Эй Джей; Хардеман, EC (2005). «Изоформы тропомиозина: предсказательные стержни для функции актинового цитоскелета». Тенденции Cell Biol. 15 (6): 333–341. Дои:10.1016 / j.tcb.2005.04.007. PMID 15953552.
  3. ^ а б Gunning, P.W .; Ghoshdastider, U; Уитакер, S; Попп, Д; Робинсон, Р. С. (2015). «Эволюция композиционно и функционально различных актиновых филаментов». Журнал клеточной науки. 128 (11): 2009–19. Дои:10.1242 / jcs.165563. PMID 25788699.
  4. ^ Эйр, Н; Аккари, Пенсильвания; Уилтон, SD; Каллен, округ Колумбия; Бейкер, Э; Лэйнг, Н.Г. (1995). «Отнесение гена альфа-тропомиозина скелетных мышц человека (TPM1) к полосе 15q22 путем флуоресцентной гибридизации in situ». Cytogenet Cell Genet. 69 (1–2): 15–17. Дои:10.1159/000133928. PMID 7835079.
  5. ^ Хант, СС; Эйр, HJ; Аккари, Пенсильвания; Мередит, C; Дорош, С.М.; Уилтон, SD; Callen, DF; Laing, NG; Бейкер, E (1995). «Отнесение гена бета-тропомиозина скелетных мышц человека (TPM2) к полосе 9p13 путем флуоресцентной гибридизации in situ». Cytogenet Cell Genet. 71 (1): 94–95. Дои:10.1159/000134070. PMID 7606936.
  6. ^ Уилтон, SD; Эйр, H; Аккари, Пенсильвания; Уоткинс, ХК; MacRae, C; Laing, NG; Каллен, округ Колумбия (1995). «Отнесение гена α-тропомиозина скелетных мышц человека (TPM3) к 1q22 -> q23 путем флуоресцентной гибридизации in situ». Cytogenet Cell Genet. 68 (1–2): 122–124. Дои:10.1159/000133905. PMID 7956350.
  7. ^ Уилтон, SD; Lim, L; Дорош, С.Д .; Ганн, ХК; Эйр, HJ; Callen, DF; Лэйнг, Н.Г. (1996). «Отнесение гена альфа-тропомиозина скелетных мышц человека (TPM4) к полосе 19p13.1 посредством флуоресцентной гибридизации in situ». Cytogenet Cell Genet. 72 (4): 294–296. Дои:10.1159/000134206. PMID 8641132.
  8. ^ а б Лиз-Миллер, JP; Хельфман Д.М. (1991). «Молекулярные основы разнообразия изоформ тропомиозина». BioEssays. 13 (9): 429–437. Дои:10.1002 / bies.950130902. PMID 1796905.
  9. ^ а б Мартин, C; Шевцов, Г; Ганнинг, П. (2009). «Альтернативно сплайсированные N-концевые экзоны в изоформах тропомиозина не действуют как автономные нацеленные сигналы». J Struct Biol. 170 (2): 286–293. Дои:10.1016 / j.jsb.2009.12.016. PMID 20026406.
  10. ^ а б c d е Ганнинг, П; О'Нил, G; Хардеман, Э (2008). «Основанная на тропомиозине регуляция актинового цитоскелета во времени и пространстве». Physiol Rev. 88 (1): 1–35. Дои:10.1152 / Physrev.00001.2007. PMID 18195081.
  11. ^ Ruiz-Opazo, N; Вайнбергер, Дж; Надаль-Жинар Б. (1985). «Сравнение последовательностей альфа-тропомиозина из гладких и поперечно-полосатых мышц». Природа. 315 (6014): 67–70. Bibcode:1985Натура.315 ... 67R. Дои:10.1038 / 315067a0. PMID 3838802.
  12. ^ Ruiz-Opazo, N; Надаль-Жинар, Б. (1987). «Организация гена альфа-тропомиозина. Альтернативное сплайсинг дублированных изотип-специфичных экзонов приводит к образованию иоформ гладких и поперечно-полосатых мышц». J Biol Chem. 262 (10): 4755–4765. PMID 3558368.
  13. ^ Байзель, G; Кеннеди, Дж. Э. (1994). «Идентификация новых альтернативно сплайсированных изоформ гена, кодирующего тропомиозин, TMnm, в улитке крысы». Ген. 143 (2): 251–256. Дои:10.1016/0378-1119(94)90105-8. PMID 8206382.
  14. ^ Лиз-Миллер, JP; Гудвин, LO; Хельфман Д.М. (1990). «Три новые изоформы тропомиозина головного мозга экспрессируются из гена альфа-тропомиозина крысы с использованием альтернативных промоторов и альтернативного процессинга РНК». Mol Cell Biol. 10 (4): 1729–1742. Дои:10.1128 / MCB.10.4.1729. ЧВК 362279. PMID 2320008.
  15. ^ Heimann, K; Персиваль, JM; Weinberger, R; Ганнинг, П; Стоу, JL (1999). «Специфические изоформы актин-связывающих белков на различных популяциях везикул, полученных из Гольджи» (PDF). J Biol Chem. 274 (16): 10743–10750. Дои:10.1074 / jbc.274.16.10743. PMID 10196146.
  16. ^ а б Персиваль, JM; Hughes, JA; Браун, DL; Шевцов, Г; Heimann, K; Врховски, Б; Bryce, N; Стоу, JL; Ганнинг, П. (2004). «Нацеливание изоформы тропомиозина на короткие микрофиламенты, связанные с комплексом Гольджи». Клетка Mol Biol. 15 (1): 268–280. Дои:10.1091 / mbc.E03-03-0176. ЧВК 307546. PMID 14528022.
  17. ^ а б c Персиваль, JM; Thomas, G; Петух, TA; Гардинер, EM; Джеффри, штат Пенсильвания; Lin, JJ; Weinberger, RP; Ганнинг, П. (2000). «Сортировка изоформ тропомиозина в синхронизированных фибробластах NIH 3T3: данные о различных популяциях микрофиламентов». Цитоскелет клеточного мотиля. 47 (3): 189–208. Дои:10.1002 / 1097-0169 (200011) 47: 3 <189 :: aid-cm3> 3.0.co; 2-с. PMID 11056521.
  18. ^ а б c d Lin, JJ; Hegmann, TE; Лин, JL (1988). «Дифференциальная локализация изоформ тропомиозина в культивируемых немышечных клетках». J Cell Biol. 107 (2): 563–572. Дои:10.1083 / jcb.107.2.563. ЧВК 2115218. PMID 3047141.
  19. ^ Burgoyne, RD; Норман, К.М. (1985). «Иммуноцитохимическая локализация тропомиозина в мозжечке крысы». Brain Res. 361 (1–2): 178–184. Дои:10.1016/0006-8993(85)91287-9. PMID 4084791.
  20. ^ Burgoyne, RD; Норман, К.М. (1985). «Наличие тропомиозина в хромаффинных клетках надпочечников и его связь с мембранами хромаффинных гранул». FEBS Lett. 179 (1): 25–28. Дои:10.1016/0014-5793(85)80183-6. PMID 3880708.
  21. ^ а б Ганнинг, П; Hardeman, E; Джеффри, П.; Вайнбергер, Р. (1998). «Создание внутриклеточных структурных доменов: пространственное разделение изоформ актина и тропомиозина в нейронах». BioEssays. 20 (11): 892–900. Дои:10.1002 / (SICI) 1521-1878 (199811) 20:11 <892 :: AID-BIES4> 3.0.CO; 2-D. PMID 9872055.
  22. ^ Шевцов, Г; Врховски, Б; Брайс, штат Нью-Йорк; Эльмир, С; Цю, MR; О'Нил, GM; Ян, N; Verrills, NM; и другие. (2005). «Тканеспецифическая изоформа тропомиозина». J Histochem Cytochem. 53 (5): 557–570. Дои:10.1369 / jhc.4A6505.2005. PMID 15872049.
  23. ^ Lin, JJ; Лин, JL (1986). «Создание сборки различных изоформ актина и тропомиозина в скелетные микрофиламенты, обогащенные тропомиозином во время дифференцировки мышечных клеток in vitro». J Cell Biol. 103 (6): 2173–2182. CiteSeerX 10.1.1.336.5976. Дои:10.1083 / jcb.103.6.2173. ЧВК 2114574. PMID 3536961.
  24. ^ Ки, Эй Джей; Шевцов, Г; Наир-Шалликер, В .; Робинсон, CS; Врховски, Б; Ghoddusi, M; Куи, MR; Lin, JJ; и другие. (2004). «Сортировка немышечного тропомиозина в новый цитоскелетный компартмент в скелетных мышцах приводит к мышечной дистрофии». J Cell Biol. 166 (5): 685–696. Дои:10.1083 / jcb.200406181. ЧВК 2172434. PMID 15337777.
  25. ^ Had, L; Faivre-Sarrailh, C; Легран, С; Мери, Дж; Бругиду, Дж; Раби, А (2005). "Tropomyosin isoforms in rat neurons:the different developmental profiles and distributions of TM-4 and TMBr-3 are consistent with different functions". J Cell Sci. 107: 2961–2973. PMID 7876361.
  26. ^ а б Hannan, AJ; Gunning, P; Jeffrey, PL; Weinberger, RP; Weinberger, RP (1995). "Intracellular localization of tropomyosin mRNA and protein is associated with development of neuronal polarity". Mol Cell Neurosci. 6 (5): 397–412. Дои:10.1006/mcne.1995.1030. PMID 8581312.
  27. ^ а б Schevzov, G; Bryce, NS; Almonte-Baldonado, R; Joya, J; Lin, JJ; Hardeman, E; Weinberger, R; Gunning, P (2005). "Specific features of neuronal size and shape are regulated by tropomyosin isoforms". Клетка Mol Biol. 16 (7): 3425–3437. Дои:10.1091/mbc.E04-10-0951. ЧВК 1165423. PMID 15888546.
  28. ^ Schevzov, G; Ллойд, К; Hailstones, D; Gunning, P (1993). "Differential regulation of tropomyosin isoform organization and gene expression in response to altered actin gene expression". J Cell Biol. 121 (4): 811–821. Дои:10.1083/jcb.121.4.811. ЧВК 2119789. PMID 8491774.
  29. ^ Schevzov, G; Gunning, P; Jeffrey, PL; Temm-Grove, C; Helfman, DM; Lin, JJ; Weinberger, RP (1997). "Tropomyosin localization reveals distinct populations of microfilaments in neurites and growth cones". Mol Cell Neurosci. 8 (6): 439–454. Дои:10.1006/mcne.1997.0599. PMID 9143561.
  30. ^ Lui, H; Bretscher, A (1992). "Characterization of TPM1 disrupted yeast cells indicates an involvement of tropomyosin in directed vesicular transport". J Cell Biol. 118 (2): 285–299. Дои:10.1083/jcb.118.2.285. ЧВК 2290051. PMID 1629236.
  31. ^ а б c Bryce, NS; Schevzov, G; Ferguson, V; Percival, JM; Lin, JJ; Matsumura, F; Bamburg, JR; Jeffrey, PL; и другие. (2003). "Specification of actin filament function and molecular composition by tropomyosin isoform". Клетка Mol Biol. 14 (3): 1002–1016. Дои:10.1091/mbc.E02-04-0244. ЧВК 151575. PMID 12631719.
  32. ^ Bernstein, BW; Bamburg, JR (1982). "Tropomyosin binding to F-actin protects the F-actin from disassembly by brain actin-depolymerizing factor (ADF)". Cell Motil. 2 (1): 1–8. Дои:10.1002/cm.970020102. PMID 6890875.
  33. ^ Hendricks, M; Weintraub, H (1981). "Tropomyosin is decreased in transformed cells". Proc Natl Acad Sci USA. 78 (9): 5633–5637. Bibcode:1981PNAS...78.5633H. Дои:10.1073/pnas.78.9.5633. ЧВК 348810. PMID 6272310.
  34. ^ Hendricks, M; Weintraub, H (1984). "Multiple tropomyosin polypeptides in chicken embryo fibroblasts: differential repression of transcription by Rous sarcoma virus transformation". Mol Cell Biol. 4 (9): 1823–1833. Дои:10.1128/MCB.4.9.1823. ЧВК 368992. PMID 6208481.
  35. ^ Lin, JJ; Helfman, DM; Hughes, SH; Chou, CS (1985). "Tropomyosin isoforms in chicken embryo fibroblasts: purification, characterization, changes in Rous sarcoma virus-transformed cells". J Cell Biol. 100 (3): 692–703. Дои:10.1083/jcb.100.3.692. ЧВК 2113520. PMID 2982883.
  36. ^ Takenaga, K; Накамура, Y; Sakiyama, S (1988). "Differential expression of a tropomyosin isoform in low- and high-metastatic Lewis lung carcinoma cells". Mol Cell Biol. 8 (9): 3934–3937. Дои:10.1128/MCB.8.9.3934. ЧВК 365453. PMID 3221870.
  37. ^ Takenaga, K; Накамура, Y; Токунага, К; Kageyama, H; Sakiyama, S (1988). "Isolation and characterization of a cDNA that encodes mouse fibroblast tropomyosin isoform2". Mol Cell Biol. 8 (12): 5561–5565. Дои:10.1128/MCB.8.12.5561. ЧВК 365662. PMID 3244365.
  38. ^ Lin, JL; Geng, X; Bhattacharya, SD; Yu, JR; Reiter, RS; Sastri, B; Glazier, KD; Mirza, ZK; и другие. (2002). "Isolation and sequencing of a novel tropomyosin isoform preferentially associated with colon cancer". Гастроэнтерология. 123 (1): 152–162. Дои:10.1053/gast.2002.34154. PMID 12105844.
  39. ^ Pawlak, G; McGarvey, TW; Nguyen, TB; Tomaszewski, JE; Puthiyaveettil, R; Malkowicz, SB; Helfman, DM (2004). "Alterations in tropomyosin isoform expression in human transitional cell carcinoma of the urinary bladder". Int J Рак. 110 (3): 368–373. Дои:10.1002/ijc.20151. PMID 15095301.
  40. ^ Miyado, K; Кимура, М; Taniguchi, S (1996). "Decreased expression of a single tropomyosin isoform, TM5/TM30nm, results in reduction in motility of highly metastatic B16-F10 mouse melanome cells". Biochem Biophys Res Commun. 225 (2): 427–435. Дои:10.1006/bbrc.1996.1190. HDL:2324/24778. PMID 8753779.
  41. ^ Das, KM; Дасгупта, А; Mandal, A; Geng, X (1993). "Autoimmunity to cytoskeletal protein tropomyosin. A clue to the pathogenetic mechanism fr ulcerative colitis". J Immunol. 150 (6): 2487–2493. PMID 8450225.
  42. ^ biancone, L; Monteleone, G; Marasco, R; Pallone, F (1998). "Autoimmunity to tropomyosinisoforms in ulcerative colitis (UC) patients and unaffected relatives". Клин Эксп Иммунол. 113 (2): 198–205. Дои:10.1046/j.1365-2249.1998.00610.x. ЧВК 1905040. PMID 9717968.
  43. ^ Geng, X; Biancone, L; Dai, HH; Lin, JJ; Yoshizaki, N; Дасгупта, А; Pallone, F; Das, KM (1998). "Tropomyosin isoform in intestinal mucosa: production of autoantibodies to tropomyosin isoform in ulcerative colitis". Гастроэнтерология. 114 (5): 912–922. Дои:10.1016/S0016-5085(98)70310-5. PMID 9558279.
  44. ^ Biancone, L; Palmieri, G; Lombardi, A; Colantoni, A; Tonelli, F; Das, KM; Pallone, F (2003). "tropomyosin expression in the ileal pouch: a relationship with the development of pouchitis in ulcerative colitis". Am J Gastroenterol. 98 (12): 2719–2726. PMID 14687823.
  45. ^ Dohlam, JG; Lupas, A; Carson, M (1993). "Long charge-rich alpha-helices in systemic autoantigens". Biochem Biophys Res Commun. 195 (2): 686–696. Дои:10.1006/bbrc.1993.2100. PMID 8373407.
  46. ^ Khanna, AK; Nomura, Y; Fischetti, VA; Zabriskie, JB (1997). "Antibodies in the sera of acute rheumatic fever patients bind to human cardiac tropomyosin". J Аутоиммунный. 10 (1): 99–106. Дои:10.1006/jaut.1996.0107. PMID 9080304.
  47. ^ Mor, F; Weinberger, A; Cohen, IR (2002). "Identification of alpha-tropomyosin as a target self-antigen in Behcet's syndrome". Eur J Immunol. 32 (2): 356–365. Дои:10.1002/1521-4141(200202)32:2<356::AID-IMMU356>3.0.CO;2-9. PMID 11807775.
  48. ^ Tong WS, Yuen AW, Wai CY, Leung NY, Chu KH, Leung PS (2018). "Diagnosis of fish and shellfish allergies". J Астма Аллергия. 11: 247–60. Дои:10.2147/JAA.S142476. ЧВК 6181092. PMID 30323632.
  49. ^ Ruethers T, Taki AC, Johnston EB, Nugraha R, Le TT, Kalic T, McLean TR, Kamath SD, Lopata AL (August 2018). "Seafood allergy: A comprehensive review of fish and shellfish allergens". Мол. Иммунол. 100: 28–57. Дои:10.1016/j.molimm.2018.04.008. PMID 29858102.
  50. ^ Thalayasingam M, Lee BW (2015). "Fish and shellfish allergy". Химическая иммунная аллергия. 101: 152–61. Дои:10.1159/000375508. PMID 26022875.
  51. ^ Lopata AL, Kleine-Tebbe J, Kamath SD (2016). "Allergens and molecular diagnostics of shellfish allergy: Part 22 of the Series Molecular Allergology". Аллерго J Int. 25 (7): 210–218. Дои:10.1007/s40629-016-0124-2. ЧВК 5306157. PMID 28239537.
  52. ^ Santos, A. B.; Chapman, M. D.; Aalberse, R. C.; Vailes, L. D.; Ferriani, V. P.; Oliver, C.; Rizzo, M. C.; Naspitz, C. K.; и другие. (1999). "Cockroach allergens and asthma in Brazil: identification of tropomyosin as a major allergen with potential cross-reactivity with mite and shrimp allergens". Журнал аллергии и клинической иммунологии. 104 (2): 329–337. Дои:10.1016/S0091-6749(99)70375-1. PMID 10452753.

внешняя ссылка